Resumen
OBJETIVOS: - Aislar y evaluar células madre de la pulpa dental humana (DPSCh). - Establecer en Uruguay un protocolo de aislamiento de DPSCh. - Analizar cuantitativamente y cualitativamente las células aisladas. MÉTODOS: Fueron utilizados 10 terceros molares sanos donados por pacientes de entre 18 y 30 años que concurrieron a la Facultad de Odontología, UdelaR y otorgaron su consentimiento escrito. Dichas piezas fueron colocadas en medio de transporte y procesadas antes de las 48 hs. en el INDT.En el laboratorio se realizó la fractura de la pieza en cámara de flujo laminar para proceder a la obtención del tejido pulpar y su procesado por el método explante. Obtenida una confluencia del 80% se realizaron 3 pasajes. En cada pasaje se analizó: Morfología por técnicas de microscopía óptica, viabilidad celular y conteo en cámara de Neubauer. Al tercer pasaje se realizó la caracterización celular mediante citometría de flujo, con los marcadores CD29, CD73, CD90, CD105 y CD166 como marcadores positivos (específicos), CD34 y CD45 como marcadores negativos. RESULTADOS: Se logró obtener DPSCh por primera vez en Uruguay. Las células obtenidas presentaron una vitalidad mayor al 90% en todos los pasajes, observándose una morfología característica de células madre mesenquimales y a la citometría de flujo, resulto negativa para los marcadores hematopoyéticos CD34 y CD45, y una positividad mayor al 95% en marcadores específicos. CONCLUSIONES: Se logró establecer un protocolo de aislamiento celular, con alta tasa de éxito y seguridad para aislar DPSCh.(AU)
